Leeming-Notman液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)
培養(yǎng)基的種類有哪些?鑒別培養(yǎng)基:利用細(xì)菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同,在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑,觀察細(xì)菌生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物,通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別細(xì)菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍(lán)瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基等。選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,去抑制標(biāo)本中的雜菌生長,有助于所選擇的細(xì)菌種類的生長。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌,枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌,因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。培養(yǎng)基也有不同的形態(tài),可以是液體、半固體或固體形式。Leeming-Notman液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基按成分分類有哪些?按用途分類:根據(jù)用途不同,培養(yǎng)基可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、厭氧菌培養(yǎng)基等?;A(chǔ)培養(yǎng)基(basic media) 大多數(shù)微生物共同需要的營養(yǎng)基礎(chǔ)。某--微生物如有特殊需要,可在此基礎(chǔ)上添加某種成分即可,如蛋白胨水、肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂等。1%蛋白胨水培養(yǎng)基便是一個較簡單的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,該基礎(chǔ)培養(yǎng)基本身可供一般細(xì)菌增菌培養(yǎng)和靛基質(zhì)試驗用,若再加入指示劑和糖類,則配成糖發(fā)酵培養(yǎng)基,供糖發(fā)酵試驗用,成為鑒別培養(yǎng)基;若在1%蛋白胨水中增加氯化鈉用量并將pH提高到8.6左右,則變成堿性蛋白胨水,用于霍亂弧菌的增菌培養(yǎng),成為專門用的增菌培養(yǎng)基。S培養(yǎng)基微生物的供能方式會影響它對營養(yǎng)物質(zhì)的利用,因此不同微生物需要不同成分的培養(yǎng)基。
要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進(jìn)行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言,更是要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達(dá)到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進(jìn)行滅菌,某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基,可先將糖進(jìn)行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。
培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,一般來講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制,往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高。培養(yǎng)基是一種含有必需營養(yǎng)物質(zhì)的生長介質(zhì),用于細(xì)胞、細(xì)菌的培養(yǎng)和繁殖。
血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。血清主要作用:提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。培養(yǎng)基是一種營養(yǎng)物質(zhì)混合物,可以為細(xì)胞提供生長所需的物質(zhì)。SCCRAM 肉湯
無機培養(yǎng)基則為化學(xué)合成培養(yǎng)基,其用途從分離細(xì)菌到研究微生物生理生化特性都普遍應(yīng)用。Leeming-Notman液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)
在培養(yǎng)基中加入 HEPES 有何好處?培養(yǎng)基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,它可提供營養(yǎng),但卻在生理 pH 條件下會降低緩沖能力。而HEPES 是一種很強的緩沖劑,能使細(xì)胞培養(yǎng)基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強。HEPES溶液:是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動。在開放式培養(yǎng)條件下,觀察細(xì)胞時培養(yǎng)基脫離了 5%CO2 的環(huán)境,CO2 氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時可以維持 pH7.0 左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時要添加HEPES。神經(jīng)細(xì)胞原代培養(yǎng)的過程中能用到。Leeming-Notman液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)
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點膠機又稱涂膠機、滴膠機、打膠機、灌膠機等,專門對流體進(jìn)行控制。并將流體點滴、涂覆于產(chǎn)品表面或產(chǎn)品內(nèi)部的自動化機器,可實現(xiàn)三維、四維路徑點膠,精確定位,精細(xì)控膠,不拉絲,不漏膠,不滴膠。點膠機主要用于 。